高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量

　　白芍为方中君药，芍药苷为白芍的主要有效成分，具有扩张血管、保护脑缺血、抗血栓、抗血小板聚集、抗高血脂等作用，对芎钩天麻丸疗效的发挥起重要作用。现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。本文以芍药苷为指标成分，建立了测定芎钩天麻丸中芍药苷的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。

　　1仪器与试药1.1仪器Agilengt1260高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平DSQ10260超声仪。

　　1.2试药芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110736-201035);乙腈为色谱纯，水为本单位自制重蒸馏水，其余试剂为分析纯。芎钩天麻丸由柘城县人民医院提供。

　　2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：AgilengtEclipsePlus-C18色谱柱(4.6×100mm)

　　流动相：乙腈-0.1%磷酸(14：86)为流动相[2];流速0.6ml?min-1;检测波长230nm;进样量10μl;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000[3]。

　　2.2 线性关系考察取黄芩苷对照品约12.0mg，精密称定，置25ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按照 “2.1”项色谱条件，分别进样1、3、5、7、9、11、13、15、17μl，记录芍药苷峰面积值，以峰面积积分值(Y)对对照品浓度(X)进行线性回归，得回归方程：Y=235.05674X 12.52003r=0.9999。结果表明，黄芩苷对照品在0.4800～8.1600μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。

　　2.3 供试品溶液及阴性对照溶液的制备取本品约0.1g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液。另取缺白芍的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。

　　2.4干扰试验取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，黄芩苷的保留时间为8.818min，理论塔板数为3512，黄芩苷与相邻峰的分离度大于1.5，峰型对称。

　　2.5 精密度试验取2.2对照品溶液，重复进样6 次，每次10 μl，记录绿原酸峰面积，RSD=0.39%(n=6)，表明精密度良好。

　　2.6 稳定性试验取同一对照品溶液，分别在0、2、4、8、12、16、24 h进样测定，RSD=0.43%，供试品溶液在24 小时内峰面积基本稳定。

　　2.7 加样回收率试验称取6 份已知含量为6.173 mg/g的样品约0.05 g，精密称定，分别置1～6 号锥形瓶中，分别精密加入对照品储备液1 ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。