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卡迈舒生物今日推荐阅读-MS培养基母液的配置与保存

发布日期:2014-07-16 来源:网络
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仪器与用具

1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱;

2、用具:烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签;

3、试剂:95%酒精,0.1-1NNaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物,蒸馏水。

方法步骤

(一)母液的配制

母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。

优点:(1)保证各物质成分的准确性。

(2)便于配置时快速移取。

(3)便于低温保藏。

1、MS大量元素母液(10X)

称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。

 

化学药品

1升量

10升量

①

NH4NO3

1650 mg/L

16.5g

②

KNO3

1900 mg/L

19.0g

③

CaCl2·2H2O

440 mg/L

4.4g

④

MgSO4·7H2O

370 mg/L

3.7g

⑤

KH2PO4

170 mg/L

1.7g

 

2、MS微量元素母液(100X)

    称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

 

化学药品

1升量

10升量

①

MnSO4·4H2O

( MnSO4·H2O)

22.3 mg/L

(21.4 mg/L)

223mg

②

ZnSO4·7H2O

8.6 mg/L

86mg

③

CoCl2·6H2O

0.025mg/L

0.25mg

④

CuSO4·5H2O

0.025 mg/L

0.25mg

⑤

Na2MoO4·2H2O

0.25 mg/L

2.5mg

⑥

KI

0.83 mg/L

8.3 mg

⑦

H3BO3

6.2 mg/L

62 mg

注意:CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量(0.25 mgX10=2.5mg)或100倍量(25mg)称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml(即含0.25mg的量)加入到母液中。

3、MS铁盐母液(100X)

称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

化学药品

1升量

10升量

Na2·EDTA

37.3 mg/L

373 mg

FeSO4·7H2O

27.8 mg/L

278 mg

注意配制时,应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,可适当加热。混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡,至产生深黄色溶液,最后定容,保存在棕色试剂瓶中。

 

 

4、MS有机物母液(100X)

称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

 

化学药品

1升量

10升量

①

烟酸

0.5 mg/L

5mg

②

盐酸吡哆素(VB6)

0.5 mg/L

5mg

③

盐酸硫胺素(VB1)

 

 

④

肌醇

100 mg/L

1 g

⑤

甘氨酸

2 mg/L

20mg

 

5、生长调节剂

单独配制,浓度为1-5 mg/ml(书中为0.5-1mg/ml),一般配成4 mg/ml 。

配制培养基母液时注意事项:

①一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合;

②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;

③药品应用化学纯或分析纯;

④溶解生长素时,可用少量0.5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5–1N的HCl加热溶解。

(二)母液的保存

1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中,贴好标签,注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期。注意将易分解、氧化的溶液,放入棕色瓶中保存。

2、贮藏:4℃冰箱。

 

MS培养基配方

 

 

 

 

 

 

 

 

 

成分

分子量

使用浓度(mg/L)

 

 

大量元素

硝酸钾 KNO3

101.11

1900

 

 

硝酸铵 NH4NO3

80.04

1650

 

 

磷酸二氢钾 KH2PO4

136.09

170

 

 

硫酸镁 MgSO4.7H2O

246.47

370

 

 

氯化钙 CaCl2.2H2O

147.02

440

 

 

 

 

 

 

 

 

微量元素

碘化钾 KI

166.01

0.83

 

 

硼酸 H3BO3

61.83

6.2

 

 

硫酸锰 MnSO4.4H2O

223.01

22.3

 

 

硫酸锌 ZnSO4.7 H2O

287.54

8.6

 

 

钼酸钠 Na2MoO4.2 H2O

241.95

0.25

 

 

硫酸铜 CuSO4.5 H2O

249.68

0.025

 

 

氯化钴 CoCl2.62

237.93

0.025

 

 

 

 

 

 

 

 

铁盐

乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA

372.25

37.3

 

 

硫酸亚铁 FeSO24.7H2O

278.03

27.8

 

 

 

 

 

 

 

 

有机成分

肌醇

 

100

 

 

甘氨酸

 

2

 

 

盐酸硫胺素 VB1

 

0.1

 

 

盐酸吡哆醇 VB6

 

0.5

 

 

烟酸 VB5或VPP

 

0.5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

蔗糖 sucrose

342.31

30g/L

 

 

 

 

 

 

 

 

 

琼脂 agar

 

7 g/L

 







(本文来源:网络 责任编辑:expert)

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