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ELISA试剂盒实验重点之方法的原理根据

发布日期:2014-04-25 来源:网络
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  在今天上午的时候有位来自湖北中医药大学的段老师通过在线留言的方式给我们留下的需要的产品名称(试剂盒)与联系方式,我公司何经理在第一时间给段老师回复了电话。在何经理与段老师洽谈的过程中提到了实验的原理是什么,何经理立马向技术人员发送了相关实验原理咨询的邮件。今天在这里,上海恒远生物给朋友们说说ELISA试剂盒实验重点之方法的原理根据。

  在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。

  应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品的浓度。

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(本文来源:网络 责任编辑:expert)

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