谷物淀粉含量的测定（旋光法）

实验试剂乙醚、氯化高汞、乙醇、醋酸-氯化钙、30%ZnSO4、15%K4Fe(CN)。

实验设备离心机、天平、旋光仪、250ml三角瓶、漏斗、离心管、小电炉。

实验材料面粉

实验步骤1. 样品准备

1)称取样品：精确称取约2.5g样品细粉(要求含淀粉约2g)，置于离心管内。

2)脱脂：加乙醚数ml到离心管内，用细玻棒充分搅拌，然后离心。倾出上清液并收集以备回收乙醚。重复脱脂数次，以去除大部分油脂、色素等(因油脂的的存在会使以后淀粉溶液的过滤困难)。大多数谷物样品含脂肪较少，可免去这个脱脂手续。

3)抑制酶活性：加含有氯化高汞的溶液10ml到离心管内，充分搅拌，然后离心，倾去上清液，得到残余物。

4)脱糖：加80%乙醇10ml到离心管中，充分搅拌以洗涤残余物(每次都用同一玻棒)，离心，倾去下清液。重复洗涤数次以去除可溶性糖分。

2. 溶提淀粉

1)加醋酸-氯化钙：先用醋酸氯化钙溶液约10ml加到离心管中，搅拌后全部倾入250ml三角瓶内，再用醋酸氯化钙溶液50ml分数次洗涤离心管，洗涤液并入三角瓶内，搅拌玻棒也转移到三角瓶内。

2)煮沸溶解：先用蜡笔标记液面高度，直接置于加有石棉网的小电炉上，在4min～5min内迅速煮沸，保持沸腾15min～17min，立即将三角瓶取下，置流水中冷却。煮沸过程中要时加搅拌，勿令烧焦;要调节温度，勿使泡沫涌出瓶外;常用玻璃将瓶侧的细粒擦下;并加水保持液面高度。

3. 沉淀杂质和定容：

1)加沉淀剂：将三角瓶内的水解液转入100ml容量瓶，用醋酸氯化钙溶液充分洗涤三角瓶瓶，并入容量瓶内，加30%ZnSO41ml混合后，再加15%K4Fe(CN)61ml，用水稀释至接近刻度时，加95%乙醇一滴以破坏泡沫，然后稀释到刻度，充分混合，静置，以使蛋白充分沉淀。

2)滤清：用漏斗(加一层滤纸)过滤。先倾清溶液约10ml于此滤纸上，使其完全湿润，让溶液流干，弃去滤液，再倾清溶液进行过滤，用干燥的容器接受此滤液，收集约50ml，即可供测定之用。

4. 测定旋光度：用旋光测定管装满滤液，小心地按照旋光仪使用说明，进行旋光度的测定。

5. 结果计算

淀粉(%)=α×N×100/{[α]20D×L×(W-K)}×100

式中：α：用钠光时观测到的旋光度;[α]20 D：淀粉的比旋度，在这种方法条件下为203°;L：旋光管长度(dm);W：样品质量(g);K：样品水分含量(g);N：稀释倍数;100：换算为百分率。也可以不用上列公式计算，改用工作曲线来求得淀粉含量，这样准确度高些。