上海劲马为您分析：动物细胞培养时加动物血清的问题

　　近几年，特别是今年的浙江省生物高考实验题涉及到细胞培养的内容，有必要对细胞培养的知识进行适当的拓展。

　　教材上说动物细胞克隆培养要加动物血清(胎牛血清最好)，理由我认为除了提供必要的成分以外，还和细胞生活的内环境有关，血清可以创造细胞生活的内环境，如一定的渗透压和pH的稳定等。那么是不是一定需要加动物血清呢?据资料可知，加入血清有它的重要性：

　　人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基(如血清)。

　　血清中含有：

　　①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)

　　②多种金属离子;

　　③激素;

　　④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。

　　⑤各种生长因子

　　⑥转移蛋白

　　⑦不明成分

　　一般说来.含5%小牛血清的培养基对大多数细胞可以维持细胞不死.但支持细胞生长一般需加10%血清。

　　对于血清支持细胞生长的生物学效应已得到证明，但对血清中的复杂成分至今尚未完全清楚。

　　血清中不仅存在促细胞生长因子，同对也存在细胞生长抑制因子或毒性因子，因此在含血清培养基中培养的细胞所反映的生物学特性是细胞和复杂血清因子的综合反应。

　　血清质量好坏是365采购网-打造中国机电行业网上沃尔玛实验成败的关键。常用血清有胎牛血洁、新生牛血清、小牛血情、兔血清、马血清等，其中以胎牛血清质量最好。优质血清的标准：透明，淡黄色，无沉淀物，无细菌、支原体、病毒污染。血清的灭活(消除补体活性)：56℃ ，30分钟。血清的消毒：过滤除菌

　　但是在生长因子、蛋白质工程、基因表达调控等研究领域，迫切需要用无血清培养基培养细胞。

　　无血清培养基的主要研制策略：在基础培养基中补充各种必需因子，如激素、生长因子、结合蛋白 、贴壁和扩展因子 等。无血清培养基由基础培养基和替代血清的补充成分组成。

　　1975年，Sato首次成功地用无血清培养基培养了垂体细胞株，近20多年来已报道了几十种细胞系在无血清培养基中成功地生长和增殖。

　　无血清细胞培养基的使用保证了实验结果的准确性、可重复性和稳定性，减少了细胞污染，简化了提纯和鉴定各种细胞产物的程序。