ELISA中常见问题及解决方法

　　选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

　　加样 可能原因：

　　1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;

　　2)手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);

　　3)加完标本再加酶试剂时酶www.jyzb.cago365.com溅出孔外。

　　解决办法：

　　1) 标本为血清：最好将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟;若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。

　　2) 加样后及时放入孵箱。

　　3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

　　4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

　　5) 标本较多时，请分批操作。

　　孵育 可能原因：

　　1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底;

　　2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。

　　解决办法：

　　1) 贴封片或加盖; 2) 按说明步骤严格控制操作时间。