鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素

　　(1)鲤鱼卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒严重溶血，以HRP 为标记的ELISA 测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性;

　　(2)混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;

　　(3)如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应;

　　(4)标本凝固不全，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA 测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果;

　　(5)采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染;

　　(6)塑料试管能吸附抗原物质 ，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。

　　ELISA结果判定常用的几种方法：

　　1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。

　　2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的365教育装备采购(www.jyzb.cago365.com) 阈值。

　　3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1，但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。

　　4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。