质粒DNA提取实验的?操作步骤

　　质粒DNA提取实验的操作步骤：

　　1. 细菌繁殖：LB培养基，2 ml/20ml，37℃，200 rpm，摇一摇，过夜。

　　2. 离心10 min，5 000 rpm， 4℃;弃上淸液。

　　3. 沉淀(菌体细胞)预冷的TES缓冲液洗涤，离心10 min，5 000 rpm， 4℃，加入预冷的1 ml Solution I，冰浴10 min。

　　4. 重新悬浮，加入150 ul溶菌酶母液，室温放置5 min。

　　5. 加入1.2 ml Solution II， 冰浴5 min。

　　6. 加入0.9 ml预冷乙酸钾，混匀，离365采购网-打造中国机电行业网上沃尔玛心10 min，12 000 rpm，4℃。

　　7. 加入1.5 ml异丙醇，-20℃冰箱内放置15 min。

　　8. 离心10 min，12 000 rpm，4℃。

　　9. 取沉淀，悬于400 ul TE缓冲液中。

　　10. 加入40 ul，3 M NaAc。

　　11. 酚/氯仿，抽提，乙醇沉淀。

　　12. 离心10 min，12 000 rpm，4℃。

　　13. 取沉淀，冷冻干燥，再悬浮于50 ul TE缓冲液中。

　　14. 电泳检测提取DNA的质量。