培养基制备的基本方法和注意事项

　　1、培养基的制备记录

　　每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等。

　　记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。 2、培养基成分的称取

　　培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，最好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上面做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后，还应进行一次检查。 3、培养基各成份的混合和溶化

　　指示剂应在调节好pH值后再加入; 煮溶后要补加足水份; ? 不能把培养基煮焦，焦化的不能使用。 4、培养基pH的校正

　　灭菌后pH值会下降0.1～0.2，在做培养基校正pH值时，应比实际值高0.1～0.2; pH调整后，还应将培养基煮沸。 5、培养基的过滤澄清

　　液体培养基可用滤纸过滤法

　　琼脂培养基,可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤 6、培养基的分装

　　斜面： 1/5管 半固体培养基：1/3管 ? 高层斜面：1/4～1/3管 平板：13~15ml 7、培养基的灭菌

　　(1)含糖类或明胶的培养基： 113℃灭菌15分钟或115℃灭菌10分钟。 (2)无糖培养基： 121℃灭菌15~20分钟。

　　(3)血液、体液和抗生素等以无菌操作技术抽取后再加入冷却至约50℃左右的培养基中。

　　(4)琼脂斜面培养基应在灭菌后冷至55℃-60℃时取出，再摆置成适当斜面。 8、培养基的质量测试

　　(1)如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。

　　(2)将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。 (3)用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基，培养24～48小时，如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。 9、培养基的保存

　　(1)基础培养基不能超过两周

　　(2)生化试验培养基不宜超过一周，

　　(3)选择性或鉴别性培养最好当天使用，倾注的平板培养基不宜超过3天。