DAB配制方法

DAB配制方法

 DAB（3,3’-diaminobenzidine，3,3’-二氨基联苯胺）
　　DAB是辣根过氧化物酶作用的底物，其终产物为棕黄色沉淀，不溶于有机溶剂，可经酒精脱水、二甲苯透明后用中性树胶封片。使用中需要注意以下几点：1、DAB溶解要完全，必要时可过滤后使用，否则未溶解的颗粒沉积于标本上会影响观察；2、DAB浓度不宜过高，否则极易增加背景染色；3、DAB有致癌作用，故操作时应小心，尽量避免与皮肤接触。
1. DAB粉剂

DAB（常用四盐酸盐）	50mg
0.05mol/L TBS（0.05M, pH7.6）	100ml
30% H2O2	30~40微升

        配制方法：先以少量TBS溶解DAB，然后加入余量TBS，充分混匀，使DAB的终浓度为0.05%，过滤后显色前加入30% H2O2 30~40＆#61549;l，过滤掉沉淀物即可。
2. DAB试剂盒（编号ZLI-9017）
        在1毫升试剂2（DAB缓冲液）中，加入1滴（约50微升）试剂1（DAB浓缩液），混合均匀，即配成DAB工作液。此溶液必须现用现配，配好后避光保存，6小时内使用，剩余的液体应弃去。本品最大特点是由于自带稀释液，避免了由于各地方水酸碱度的不同对DAB显色所造成的影响。
3. DAB试剂盒（编号ZLI-9032）
       使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1~1.5ml双蒸水中，即可获得DAB工作液，简单易用。